高校实验室科学技术
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实验技术与方法
超高效液相色谱-串联质谱法测定水稻叶片中甲硫腺苷含量
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马洪雨1,杨晶2,于小波3
(1南京农业大学植物保护学院,江苏南京210095;2吉林省公主岭市范家屯镇畜牧兽医站,吉林公主岭136105;3南京农业大学食品科技学院,江苏南京210095)
马洪雨(1983—),男,博士,实验师,主要从事实验室管理及质谱分析工作。●通讯作者:于小波(1985—),女,实验师,从事实验技术研究。
摘要:
建立了一种水稻叶片中甲硫腺苷的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)定量检测方法,为水稻及其它植物生长发育的调控研究提供指导。水稻叶片粉碎后经70%的甲醇溶液2次提取,萃取液浓缩后用于上样分析。甲硫腺苷通过BEH C18(2.1×100mm,1.7μm)色谱柱进行梯度分离,0.01%的乙酸铵(W/V)溶液-乙腈做为流动相。质谱检测采用正离子模式,扫描方式为多反应监测模式(MRM),分别选择2个特征离子通道(m/z:298.31→136.13和m/z:298.31→61.06)用于甲硫腺苷的定性和定量检测,甲硫腺苷的保留时间为1.30min,空白样品无干扰影响含量测定。结果:甲硫腺苷在为50~1600ng/L,1~20μg/kg范围内线性良好(R2为0.9992),方法检测限为0.03ng/g,定量限为0.09ng/g。低、中、高3个浓度下的平均介质效应分别为85.3%、89.2%、95.6%,精密度小于5.32%。该方法简便、快速、定量检测可靠、灵敏度高,能够满足植物中甲硫腺苷研究中大规模样品的快速分析。
关键词:
甲硫腺苷;液质联用;定量检测
中图分类号:
基金项目:
中央高校基本科研业务费“科研平台实验技术;人才基金”资助(项目编号:KJSY201703,KJSY201515)。